«استانفورد مور» برندهی جایزهی نوبل ۱۹۷۲برای انالیز اسیدهای آمینه شد
روش قدیمی آمینواسید آنالایزیز که مور استفاده کرد
یکی از متداولترین روش ها برای تعیین نوع و مقدار اسیدهای آمینهای یک ترکیب پروتئینی «آمینو اسید آنالا بزيز» ( Amino acid Analysis) است. این روش با این که بسیار قدیمی است اما هنوز بسیار پر کاربرد است. استانفورد مور در دهه ی پنجاه میلادی روشی را ابداع کرد که به وسیله ی آن می توان به انواع اسیدهای آمیته ی یک نمونه پروتئینی پی برد. او اولین بار این کار را بر روی نمونه ی پپتیدی انجام داد. همچنین مقدار هر کدام از اسیدهای آمینه را نیز مشخص کرد. اکنون از این روش به همین منظور استفاده می شود. البته یادمان باشد که این روش برای تعیین توالی اسیدهای آمینه کاربرد ندارد. در زیر تصویر استانفورد مور را می بینید که به پاس همین ابداع، در سال ۱۹۷۲ جایزه نوبل دریافت کرد
کاری که استنفورد همراه با همکارانش انجام داد مراحل مختلفی داشت:
- او به روش هیدرولیز اسیدی، آمینواسیدهای رشتهی پپتیدی را شکست و آنها را بهصورت قطعات جدا از هم درآورد.
- سپس در مرحلهی بعد آمینواسیدهاای که دیگر در پیوند پپتیدی شرکت نداشتند بهوسیله نوعی از کروماتوگرافی که کروماتوگرافی ion-exchange نامیده میشود، از هم جدا کرد.
- او سپس از آمینواسیدهای شستهشده (eluted) – توضیح: وقتی مواد باقیماندهی محلول را در یک کروماتوگرافی را برای آزمایشی دیگر جمعآوری میکنند اصطلاحاً به آن eluted میگویند. – طیفی رسم کرد که اصطلاحاً به آن کروماتوگرام میگویند.
- بهوسیله مقایسه کروماتوگرام بهدستآمده با کروماتوگرام استاندارد آنها توانستند تمام انواع آمینواسیدها نمونه مورد آزمایش را مشخص کنند و همینطور مقدار هر یک را نیز محاسبه کنند
تصویر اولین کروماتوگرام
تصویر زیر اولین تصویری است که از یک آزمایش Amino acid Analysis تهیهشده است. استنفورد مور و همکارانش این تصویر را در سال ۱۹۵۱ در مقالهای که قبلاً نام آن ذکرشده است ارائه دادهاند
تغییرات روش Amino acid Analysis نسبت به قبل
پس از ابداع این روش توسط مور و همکارانش، مطالعات زیادی انجام شد این مطالعات برای رسیدن به اهداف زیر بود:
- دانشمندان میخواستند زمان انجام فرایند Amino acid Analysis را کاهش دهند.
- آنها میخواستند این فرایند را سادهسازی کنند.
- دانشمندان قصد داشتند به روشهایی دست یابند که تنوع دادههای بهدستآمده کمتر شود.
نتایج این مطالعات باعث تغییراتی در قسمت کروماتوگرافی استنفورد مور شد، اما روش هیدرولیز اسیدی که او استفاده کرده بود همچنان به همان شکل و با همان جزییات استفاده میشود.